モノサシトンボはイトトンボとしては大型です．早いものでは5月頃から羽化が行われ，7月から8月にかけて繁殖活動が多く観察でき，その後10月はじめまで生き残り成虫の姿が見られます．どちらかというと日陰が好きなトンボで，樹林に囲まれたうす暗い池や，明るい池では木が茂っているあたりに集まっています．川には生息しないトンボですが，夏など，渇水で川の水が伏流したりすると，残された水たまりにやって来ることもあります．
　未熟なモノサシトンボは，脚が赤く斑紋も水色をしていなくて，別種かと思うような色彩をしています．幼虫も独特の形態で，尾鰓が非常に長く，腹部とほぼ同じ長さがあります．羽化殻もすぐにそれと分かります．羽化した成虫は，池周辺の樹林や下草の中に入りこんでしばらくの間生活しています．

　成熟すると，オスは淡色部の斑紋が薄緑色になり，さらに成熟が進むと鮮やかな水色になります．メスは成熟しても薄緑色のままですが，老熟すると青みが出てくることがあります．オスは水際の草陰に止まってメスを待っていて，メスを見つけるとタンデムになり，交尾に至ります．

　タンデムになり，交尾を済ませたペアは，産卵場所をさがしに飛び立ちます．水面を連結態で飛び，ときどき停止飛翔も行います．飛びながらオスがメスの上に立ち上がるような姿勢をすることもあります．

　モノサシトンボは，通常生きた植物体に植物内産卵を行います．歩哨姿勢をとるのがふつうで，その姿勢をとるイトトンボに多く見られるグループ産卵もよく見られます．水面上をはう植物の茎や，水面にたおれた葉，浮葉などに産卵します．葉の表側にも裏側にも産卵するようです．

　モノサシトンボは8月後半になると数を少しずつ減らしながらも，10月に入るまで生き残っています．8月下旬に結構若い個体が見られることもあり，これらが生き残っているのかもしれません．